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目標區(qū)域捕獲

技術簡介

Target-seq是指通過多重PCR方法對目標區(qū)域進行富集，結合高通量測序和生物信息方法對目標區(qū)域進行序列測定和分析的一種技術。

檢測原理

送樣要求

注：區(qū)域＞10K，每增加10K，體積增加10uL。

技術參數(shù)

技術優(yōu)勢

（1）信息量大：可以完整覆蓋整個基因組序列，獲得高頻SNP的分型數(shù)據(jù)，以及發(fā)現(xiàn)個體特有的變異。

（2）針對性強：可針對幾Kb-200 Kb的基因連續(xù)區(qū)間，外顯子靶標以及客戶指定位點進行一次性捕獲。

（3）成本較低：對數(shù)百個樣品進行混樣建庫，大大降低了研究成本。

（4）效率極高：比起使用Sanger法的候選基因測序方法，基于二代測序技術的目標區(qū)域測序更加快速、精確、高效。

（5）適用范圍廣：Target-seq可針對有參物種DNA樣本進行檢測，有效替代芯片檢測。

案例分析

基于目標區(qū)域驗證檢測HLA-DRB1多態(tài)性與皮膚肌炎的遺傳聯(lián)系^[1]

研究背景

人白細胞抗原(HLA)的遺傳變異在皮膚肌炎（DM）發(fā)病機制中起著重要作用，本研究的目的是調查中國HLA II類DM患者與DM的關系。

研究方法

在中日友好醫(yī)院隨機抽取224例糖尿病患者和300例健康對照者。采用測序技術對HLA-DRB1等位基因進行高分辨率分型，采用PCR序列特異性引物(SSP)測定HLA-DQA1和HLA-DQB1等位基因。

研究結果

研究結果表明，HLA-DRB1*09:01和HLA-DRB1*12:01等位基因可能導致中國漢族人群成人DM的易感性。此外，具有抗黑色素瘤鑒別相關基因5 (anti-MDA5)的DM患者HLA-DRB1*12:01的頻率明顯高于不具有anti-MDA5的患者。，因此推斷HLA-DRB1*12:01基因型與DM患者anti-MDA5抗體存在顯著相關。

參考文獻

Jinming Lin, Yongbiao Zhang, Qinglin Peng, et al. Genetic Association of HLA-DRB1 Multiple Polymorphisms with Dermatomyositis in Chinese Population[J]. HLA. 2017, 90(6):354-359